【材料および方法】

1. DNA array の作製
   GenebankおよびTIGR databaseからP. gingivalisの病原性遺伝子，既知遺伝子を主に選択し（約120遺伝子），各遺伝子の特異的領域をホモロジー検索にて確認後，PCR法によって増幅した。得られたPCR産物をマイクロアレイ用スライドグラス上にスポットした。
   
   
2. 蛍光サンプルの調整
   菌体をearly-log, mid-log, late-logおよびstationary phaseに増殖させ，それぞれのステージからtotal RNAを抽出した。Random primer存在下でRT反応を行い，cDNA合成過程で蛍光色素を取り込ませた。
   
   
3. ハイブリダイゼーションおよび蛍光強度の測定
   自動ハイブリダイゼーション装置中で蛍光試料をDNAアレイ上にハイブリダイゼーションを行い，洗浄後，アレイスキャナーを用いて各遺伝子の蛍光強度を測定した。また，解析は遺伝子発現解析ソフト (GeneSpringメ) を用いて行った。

【結果】
　mid-log phaseのサンプルをコントロールとして各増殖過程における発現量の変化を検討した結果，early-log phaseでは発現量の増加が認められる遺伝子が減少が認められる遺伝子よりも多く存在し，stationary phaseでは逆に発現量の減少が認められる遺伝子が増加が認められる遺伝子よりも著明に存在する結果となった。またこの結果はRT-PCRにおいても確認された。また各増殖時期においてそれぞれ特異的な遺伝子の発現が認められた。

【考察および結論】
　各菌体増殖期においてP. gingivalisが代謝･増殖するための環境を整えるために，それぞれ必要な遺伝子発現量を調整している状態が確認された。また，このようにグローバルな観点から各遺伝子の発現量を検討し，その候補となる遺伝子を挙げる目的でDNAアレイは強力なツールであることが示唆された。

共同研究者：日本大学松戸歯学部生化学教室：今岡朝代，浜島進
本研究は，　科学研究費補助金基盤研究（C）（2）13671981および文部科学省平成13年度学術フロンティア推進事業の補助を受けて行った。